血漿脂蛋白和脂質(zhì)測(cè)定是臨床生化檢驗(yàn)的常規(guī)測(cè)定項(xiàng)目,，其臨床意義主要是：①早期發(fā)現(xiàn)與診斷高脂蛋白血癥;②協(xié)助診斷動(dòng)脈粥樣硬化癥;③評(píng)價(jià)動(dòng)脈粥樣硬化疾患如冠心病腦梗塞等危險(xiǎn)度;④監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)飲食與藥物治療效果。

　　血漿脂蛋白測(cè)定分離的常用方法有超速離心法,、沉淀分離法,、電泳分離法及免疫分離法。根據(jù)脂蛋白分離純化或定性定量等不同的需要可以選擇不同的方法,，如圖16-1所示,。

　　圖16-1 人血清脂蛋白的電泳和超速離心分離相應(yīng)位置模式及名稱(chēng)比較圖

　　一,、超速離心法

　　超速離心法是根據(jù)血漿中各種脂蛋白比重(密度)的差異，在強(qiáng)大離心力作用下進(jìn)行分離純化的一種方法,。

　　血漿在不同密度鹽溶液中經(jīng)過(guò)超速離心,，各種脂蛋白按密度大小漂浮于不同鹽溶液介質(zhì)中。脂蛋白漂浮的恒量單位是漂浮率(Sf),，Gofman等于1950年確定,，血漿脂蛋白在比重為1.063的NaCl溶液中(26℃)，每秒每達(dá)因克離心力的作用下的漂浮速度,，稱(chēng)為1個(gè)Svedberg單位(10-13Sf),。Sf越大，脂蛋白密度越低,。

　　一般操作方法是將血漿置于已準(zhǔn)備好的不同密度梯度的鹽溶媒介質(zhì)中,，在強(qiáng)大離心力作用下，各脂蛋白依其自身在不同分散于相應(yīng)的離心管中的密度梯度同一密度層媒層,，達(dá)到分離純化的目的,。

　　越速離心法是分離純脂蛋白的有效技術(shù)，目前廣泛應(yīng)用于脂蛋白載脂蛋白代謝的研究中,。

　　二,、電泳分離法

　　不同脂蛋白因蛋白質(zhì)含量不同，其荷電量不同,，故可用電泳方法進(jìn)行分離,，并根據(jù)血漿脂蛋白的電泳遷移率不同予以判斷、確認(rèn),。電泳支持物一般常用醋酸纖維薄膜,、瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠。由于醋酸纖維薄膜要予處理,，很繁雜,，外加電泳時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，目前已很少使用,。臨床檢驗(yàn)中主要采用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離,，快而較為準(zhǔn)確，儀器設(shè)備要求不高,，被廣泛采用,。聚丙烯酰胺凝膠作為支持物，分離脂蛋白,，分離率高又準(zhǔn)確,，值得推薦給臨床使用。

　　電泳分離法,，不論用何種支持物,，血漿脂蛋白需用親脂染料如蘇丹黑B等進(jìn)行預(yù)染再電泳,，電泳完畢，脂蛋白根據(jù)荷電量不同,，其適移率不同,，再置于光密度下進(jìn)行掃描，計(jì)算出各種脂蛋白百分比,，該數(shù)值乘以血漿總脂量,，即可求出α-脂蛋白，β-脂蛋白和前β-脂蛋白含量,。乳糜微粒停留在原點(diǎn),，無(wú)法測(cè)出其含量，正人空腹12h后,，血漿中無(wú)CM存在,。也可將電泳完畢的瓊脂糖凝膠中的脂蛋白區(qū)帶切割置于試管中,，加水溶解,，進(jìn)行比色，測(cè)出各自百分比,，但因其是手工半定量法,，難以測(cè)準(zhǔn)，屬淘汰之列,。

　　三,、沉淀分離法

　　由于脂蛋白的組成及理化性質(zhì)不同，在不同的聚陰離子和2價(jià)不同金屬離子(Mn2+,、Mg2+,、Ca2+、Ni2+,、Co2+)以及不同pH值條件下,，使脂蛋白與聚陰離子結(jié)合形成復(fù)合物沉淀，以達(dá)到分離定量各種脂蛋白的目的,，如以肝素錳沉淀劑先沉淀血清中VLDL和LDL,，離心，HDL在上清液里,，再定量HDL量,，即為血漿HDL的量。采用聚乙烯硫酸鹽沉淀LDL,，測(cè)定血漿的LDL量,。

　　脂蛋白是一種既有蛋白質(zhì)，又有膽固醇,，還有磷脂的復(fù)合體,，如何定量,，目前尚無(wú)理想的方法。現(xiàn)在以測(cè)定脂蛋白中膽固醇總量的方法作為脂蛋白的定量依據(jù),。即測(cè)定HDL,、LDL或VLDL中的膽固醇，并分別稱(chēng)為高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C),、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)或極低密度脂蛋白-膽固醇(VLDL-C),。這類(lèi)測(cè)定方法是目前臨床廣泛使用的快速并較為準(zhǔn)確的方法。