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標(biāo)準(zhǔn)版

第二節(jié) 載脂蛋白B族

《動(dòng)脈粥樣硬化》

字號(hào): + - 16

  體外實(shí)驗(yàn)表明,載脂蛋白B是難溶于水的蛋白質(zhì),。目前所知,,ApoB族可分為兩個(gè)亞類,,即ApoB48和ApoB100。ApoB主要成份是B100,,其次為B48,,其他形式如ApoB75,ApoB41,,ApoB36等均為ApoB100的不同降解產(chǎn)物,。

  一、ApoB100

  從1966年Margoli和Landgon開(kāi)始研究ApoB100的結(jié)構(gòu),,不同實(shí)驗(yàn)室以特異性蛋白水解酶或化學(xué)裂解法研究ApoB的結(jié)構(gòu),,所得ApoB純度均不盡人意。作者曾于1986年采用特殊的沉淀抽提法獲得高純度的血清ApoB100純品,,以化學(xué)裂解法在國(guó)內(nèi)首先報(bào)道了ApoB100純品的氨基酸組成,,與Ologsson報(bào)道的結(jié)果基本一致,如表3-1所示,。

  表1 人的ApoB100的氨基酸組成

  種類mol/103mol氨基酸

  作者制備的OlogssonAvogaroYangYang

  ApoB100ApoLDLApoBApoB100ApoB100

  Lys65.2676.9±1.069.3±1.967.378.9

  His18.4625.1±0.519.5±1.725.423.4

  Arg34.9735.4±3.337.0±6.832.131.7

  Asp100.9683.6±1.694.5±7.4106.2103.6

  Thr65.1258.1±2.164.8±3.163.767.8

  Ser81.3072.3±1.882.0±4.081.387.1

  Glu120.91122.4±2.2130.1±3.1123.8117.4

  Pro41.0743.7±3.546.2±3.137.840.3

  Gly57.4554.0±2.465.3±7.948.246.3

  Ala111.2967.4±1.372.6±2.761.159.5

  Val59.4859.7±1.357.0±2.761.157.5

  1/2Cystine6.728.0±1.414.5±2.66.75.6

  Met14.4519.7±0.516.7±1.418.116.4

  Ile61.9765.4±1.951.7±1.961.158.8

  Leu123.94130.7±2.5121.2±4.4118.0120.6

  Tyr34.5534.8±1.431.0±1.629.531.8

  Phe54.0155.4±2.338.4±2.652.847.6

  Trp未測(cè)未測(cè)未測(cè)5.76.5

  1986年楊朝諭采用生物化學(xué)方法,得到人LDL的ApoB100純品并測(cè)出了ApoB100一級(jí)結(jié)構(gòu)的氨基酸排列順序,其結(jié)果與從cDNA推導(dǎo)的序列完全一致,從而解決了二十余年懸而未決的難題,。

  ApoB100是單鏈糖蛋白,,分子量為510kD,,主要在肝臟,少數(shù)在小腸合成,。ApoB100包括27個(gè)(或24)氨基酸信號(hào)肽和4536個(gè)氨基酸殘基的成熟單體蛋白,。1986年ApoB100的全部氨基酸殘基排列順序結(jié)構(gòu)已闡明。ApoB100分子中含有25個(gè)Cys殘基,,其中有11個(gè)Cys殘基集中分布在前面500氨基酸組成區(qū)域,,形成鏈內(nèi)二硫健,所以N端高度交聯(lián)成典型球形結(jié)構(gòu),,Cys殘基通過(guò)硫脂鍵與軟脂酸硬脂酸以共價(jià)鍵相結(jié)合,,使ApoB牢固地連接著脂質(zhì)成份。ApoB100中對(duì)脂類結(jié)合的必要的結(jié)構(gòu)區(qū)域在2035~2506和4002~4527氨基酸殘基之間,,這兩個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū)域重復(fù)出現(xiàn)兩性親脂α-螺旋區(qū)段,。另有一種結(jié)合脂質(zhì)的重要結(jié)構(gòu)是含疏水和親水性氨基酸交替排列兩性親脂β-折疊結(jié)構(gòu),這種結(jié)構(gòu)分布在整個(gè)分子序列中,,但集中于四個(gè)富含脯氨酸域,,這種富含脯氨酸的重復(fù)序列是ApoB100所特有的,使ApoB100能夠?qū)⒘字瑐?cè)鏈深埋其間并使之緊密結(jié)合,。由于ApoB100的兩性α-螺旋和富含脯氨酸的疏水肽及可被脂?;腃ys殘基形成特殊結(jié)構(gòu),使得ApoB100能夠與單層極性脂牢固地結(jié)合并有許多脂質(zhì)結(jié)合區(qū),,并使其在VLDL和LDL從分泌到被清除的整個(gè)過(guò)程中,,ApoB100不在脂質(zhì)白分子間轉(zhuǎn)換,這是與其他載脂蛋白不同之處。LDL上的ApoB100結(jié)構(gòu)如圖3-1所示,。

  圖3-1 LDL上的ApoB100結(jié)構(gòu)圖

  ApoB100生理功能有:①合成裝配和分泌富含甘油三酯的VLDL;②是LDL的結(jié)構(gòu)蛋白;③是LDL受體的配體,,調(diào)節(jié)LDL從血漿中的清除速率。

  二,、ApoB48

  ApoB48因分子量是ApoB100的48%而得名,。存在于CM中,不與其他脂蛋白分子交換,。ApoB48在小腸合成,,是組裝CM所必需的載脂蛋白。由小腸細(xì)胞分泌后進(jìn)入淋巴液,,并通過(guò)胸導(dǎo)管再進(jìn)入血液循環(huán),,CM再分布到毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞,主要是骨骼肌和脂肪組織的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞,,脂肪酶可水解CM中甘油三酯的80%~90%,,剩下的脂蛋白顆粒則稱為CM殘粒,再送到肝臟,,被肝脂酶進(jìn)一步水解代謝,,最后被能識(shí)別ApoE的殘粒受體攝取。該殘粒受體是LDL受體,,還是LDL受體相關(guān)蛋白或其他蛋白質(zhì),,目前還不清楚。

  ApoB48在血漿中生物半壽期僅5~10min,,因?yàn)榉纸馑俣群芸?,在血清中的濃度很低,約相當(dāng)于ApoB100的0.1%,。經(jīng)SDS-PAGE電泳染色在VLDL組分中,,仍可檢出痕量的ApoB48。攝入含脂肪豐富的食物后,,ApoB48/ApoB100比值明顯增加,。

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